Results of the 2003-2004 GEP-ISFG collaborative study on mitochondrial DNA: focus on the mtDNA profile of a mixed semen-saliva stain.

We report here a review of the seventh mitochondrial DNA (mtDNA) exercise undertaken by the Spanish and Portuguese working group (GEP) of the International Society for Forensic Genetics (ISFG) corresponding to the period 2003-2004. Five reference bloodstains from five donors (M1-M5), a mixed stain of saliva and semen (M6), and a hair sample (M7) were submitted to each participating laboratory for nuclear DNA (nDNA; autosomal STR and Y-STR) and mtDNA analysis. Laboratories were asked to investigate the contributors of samples M6 and M7 among the reference donors (M1-M5). A total of 34 laboratories reported total or partial mtDNA sequence data from both, the reference bloodstains (M1-M5) and the hair sample (M7) concluding a match between mtDNA profiles of M5 and M7. Autosomal STR and Y-STR profiling was the preferred strategy to investigate the contributors of the semen/saliva mixture (M6). Nuclear DNA profiles were consistent with a mixture of saliva from the donor (female) of M4 and semen from donor M5, being the semen (XY) profile the dominant component of the mixture. Strikingly, and in contradiction to the nuclear DNA analysis, mtDNA sequencing results yield a more simple result: only the saliva contribution (M4) was detected, either after preferential lysis or after complete DNA digestion. Some labs provided with several explanations for this finding and carried out additional experiments to explain this apparent contradictory result. The results pointed to the existence of different relative amounts of nuclear and mtDNAs in saliva and semen. We conclude that this circumstance could strongly influence the interpretation of the mtDNA evidence in unbalanced mixtures and in consequence lead to false exclusions. During the GEP-ISFG annual conference a validation study was planned to progress in the interpretation of mtDNA from different mixtures.

Estudios linfocitarios, fenotipicos y funcionales en inmunodeficiencias primarias / Lymphocyte, phenotypic and functional studies in primary immunodeficiencies

Se estudió el fenotipo leucocitario de 64 pacientes con inmunodeficiencias primarias (IDP). También se analizaron eventos relacionados con la activación linfocitaria con expresión del antígeno CD25 (TAC) y respuesta a IL2 oxógena, y vinculados a circuitos de inmunorregulación (supresión espontánea y por factores solubles). Estos estudios funcionales se presentan tomando como modelo a la inmunodeficiencia con hiper IgM (IDHM). En la inmunodeficiencia Común Variable encontramos procentajes normales de linfocitos B y alteración de la relación CD4/CD8 y en la Agamaglobulinemia ligada al sexo, ausencia de linfocitos B y distribución normal de poblaciones reguladoras. Estos resultados diferencian a dos entidades con características clínicas e infectológicas similares. La población celular CD38 se halló aumentada en: IDP a predominio celular; Ataxia Telangiectasia, Sindrome de Hiper IgE, Sindrome de Di George (SDG) y Candidiasis Cutáneo Mucosa Crónica. El aumento de la expresión de este antígeno se correlacionó con la presencia de compromiso de la inmunidad celular. Además, en el SDG, se observó marcada disminución de células CD8+ y relación CD4/CD8 aumentada. En dos pacientes con IDHM, el perfil fenotípico correspondió al hallado en las IDP a predominio celular con disminución de población CD3, relación CD4/CD8 baja y aumento de células CD38). En ellos, la respuesta proliferativa disminuida a PHA indica compromiso de la inmunidad celular. Se halló déficit en la expresión del antígeno CD25...

Estudios linfocitarios, fenotipicos y funcionales en inmunodeficiencias primarias / Lymphocyte, phenotypic and functional studies in primary immunodeficiencies

Se estudió el fenotipo leucocitario de 64 pacientes con inmunodeficiencias primarias (IDP). También se analizaron eventos relacionados con la activación linfocitaria con expresión del antígeno CD25 (TAC) y respuesta a IL2 oxógena, y vinculados a circuitos de inmunorregulación (supresión espontánea y por factores solubles). Estos estudios funcionales se presentan tomando como modelo a la inmunodeficiencia con hiper IgM (IDHM). En la inmunodeficiencia Común Variable encontramos procentajes normales de linfocitos B y alteración de la relación CD4/CD8 y en la Agamaglobulinemia ligada al sexo, ausencia de linfocitos B y distribución normal de poblaciones reguladoras. Estos resultados diferencian a dos entidades con características clínicas e infectológicas similares. La población celular CD38 se halló aumentada en: IDP a predominio celular; Ataxia Telangiectasia, Sindrome de Hiper IgE, Sindrome de Di George (SDG) y Candidiasis Cutáneo Mucosa Crónica. El aumento de la expresión de este antígeno se correlacionó con la presencia de compromiso de la inmunidad celular. Además, en el SDG, se observó marcada disminución de células CD8+ y relación CD4/CD8 aumentada. En dos pacientes con IDHM, el perfil fenotípico correspondió al hallado en las IDP a predominio celular con disminución de población CD3, relación CD4/CD8 baja y aumento de células CD38). En ellos, la respuesta proliferativa disminuida a PHA indica compromiso de la inmunidad celular. Se halló déficit en la expresión del antígeno CD25... (AU)